Companhia Ambiental do Estado de São Paulo


Figura 2 – Esquema de procedimento para determinação de Clostridium perfringens pela



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Figura 2 – Esquema de procedimento para determinação de Clostridium perfringens pela

técnica de membrana filtrante.

Amostra


Aquecimento a 60  

±

 0,5º C



durante 15 minutos

Filtração

Ágar mCP

44,5 


±

 0,2ºC – 24 h

em anaerobiose

Colônias Azul – Esverdeadas

(sacarose -, celobiose +)

Não considerar

Colônias Amarelo Palha

(sacarose + , celobiose - )

Colônias  Roxas

(sacarose - , celobiose -)

Não considerar

Exposição ao Hidróxido de

Amônio

10-30 segundos



Colônia Típicas Magenta ou

Rosa-Escuras

(Fosfatase Ácida +)

Caldo Tioglicolato

35º C – 24 horas

Coloração de Gram

(Bacilos GRAM+)

Meio de Leite com Ferro – 44,5 

±

 0,2ºC - 2h



(Fermentação turbulenta do leite com formação

de coágulos)



TESTE CONFIRMATIVO PARA Clostridium perfringens


CETESB /L5.403 / junho/2004

17

7.  Resultados



7.1  Cálculo

7.1.1  Se não foi requerida a realização dos testes confirmativos, a partir da contagem das colônias

positivas no teste de fosfatase ácida, calcular a densidade de Clostridium perfringens em 100mL

através da aplicação da seguinte fórmula:

           Nº de colônias positivas no teste de fosfatase ácida



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